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浓缩效应是否可以提高聚丙烯酰胺的分辨率
浓缩效应是否可以提高聚丙烯酰胺的分辨率,该效应可通过引入浓缩胶和不连续缓冲溶液系统而获得。浓缩胶水处理分离胶的顶部,因此样品在进入分离胶之前首先要经过浓缩胶。它是由较低浓度的丙烯酰胺构成,当样品经过浓缩胶时由于胶内网孔较分离胶网孔大,样品的移动速度较快,使样品“堆积”在浓缩和分离胶之间。
在浓缩胶中,小分子并带有大量负电荷,CT在凝胶中的移动速率较快,而电荷较少用分子量较大的甘氨酸的移动速率较慢,由于二者在同一电场中,具有相同的电流,由此形砀电压梯度导致甘氨酸离子始络跟随在CT的后面,带有负电荷的蛋白质样品则浓缩在甘氨酸离子和CT之间向正极移动,当样品进行PH8.9的分离胶时,甘氨酸的解离度增加,在电场中的迁移率高于样品,蛋白质不再夹于两种离子之间向正极移动,这时的蛋白质依靠分子筛效应和电荷效应进行分离。

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