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电泳槽梯度胶用聚丙烯酰胺胶板的特点
制凝胶板的模具,电泳槽是夹芯式垂直电泳槽,将制凝胶胶板的模具装配好后,用溶化的1%琼脂糖(用电极缓冲液配)封底,稍等片刻即可灌胶。
试剂,用于配30%的胶液称聚丙烯酰胺57.6g,双丙烯酰胺2.4g,用蒸馏水配成100ml用于配15%的胶液C30液稀释一倍,D液(用于配4%的胶液)-称取聚丙烯酰胺7.68g,双丙烯酰胺0.32g,蒸馏水配成100ml;P液-0.3%过硫酸铵;TVB缓冲液-称取三羟甲基氢基甲烷21.55g,乙二胺四乙酸二钠1.85g硼酸11.0g,用蒸馏水配成1000ml(ph8.4)TC缓冲液-称取tris16.35g,柠檬酸9.04g,用蒸馏水配成1000ml。
浓度梯度混合器,由两支内径相同的平底玻璃管A和B组成,A管底部有侧管,B管底部直径的两端则伸出两个侧管,其中一个侧管通过细的乳胶管与A管底部的管相连,在乳胶管上用一锷鱼夹来A、B管之侧间的开关,B管的另一侧管与穿刺针(外径16mm,长130mm)相连,当打开磁力搅拌器的开关时,B管液面降低,A管中的稀胶液不断进入B管,通过B管中的磁力棒使两种不同浓度的胶液均匀混合,形成不同的浓度梯度。
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